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當前位置:首頁 > 產(chǎn)品中心 > 細胞生物學 > 細胞染色 > AC15L016小麥胚芽凝集素,AF647標記

小麥胚芽凝集素,AF647標記

簡要描述:小麥胚芽凝集素,AF647標記(下文簡稱“AF647 WAG"), 是一種與N-乙酰-D-葡萄糖胺和唾液酸結(jié)合的凝集素,可能是明亮和綠色熒光中最亮的WGA綴合物。它是目前研究多、應(yīng)用廣泛的一類凝集素。

  • 產(chǎn)品型號:AC15L016
  • 廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
  • 更新時間:2024-08-07
  • 訪  問  量:748

詳細介紹

品牌Life-iLab/李記生物貨號AC15L016
供貨周期現(xiàn)貨應(yīng)用領(lǐng)域環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),綜合

小麥胚芽凝集素,AF647標記

產(chǎn)品描述

小麥胚芽凝集素, AF647標記(下文簡稱“AF647 WAG"), 是一種與N-乙酰-D-葡萄糖胺和唾液酸結(jié)合的凝集素,可能是明亮和綠色熒光中最亮的WGA綴合物。它是目前研究多、應(yīng)用廣泛的一類凝集素。由于WGA與糖綴合物結(jié)合,其衍生物和綴合物被廣泛用于標記細胞膜和纖維化瘢痕組織,用于熒光成像和分析。WGA的糖結(jié)合特異性與β-1,4-GlcNAc-連接殘基的序列,即幾丁質(zhì)酶有關(guān)。每個單體包含兩個相同的非相互作用的結(jié)合位點,它們與34β-1,4-GlcNAc單元互補。在所檢測的單糖中,只有GlcNAcWGA結(jié)合。甘露聚糖不結(jié)合,而GalNAc只能弱結(jié)合。WGA與含有Galβ(1--4GlcNAcβ(1--3)重復(fù)序列(即聚乳糖胺型聚糖)的大寡糖中的內(nèi)部GlcNAc殘基具有高親和力結(jié)合。N-乙酰神經(jīng)氨酸只參與與WGA的低親和力相互作用。WGA顯示了復(fù)雜的糖類特異性模式,可用于復(fù)雜碳水化合物的結(jié)構(gòu)分析。

技術(shù)資料

Ex (nm)

656

Em (nm)

670

分子量:

N/A

溶劑:

Water

訂購信息

產(chǎn)品名稱

貨號

規(guī)格

小麥胚芽凝集素,AF647標記

AC15L016

1mg

運輸與保存

藍冰運輸。-20℃避光防潮保存,有效期12個月。

適用儀器

熒光顯微鏡


激發(fā):

Cy5濾波片

發(fā)射:

Cy5濾波片

推薦孔板:

黑色透明

使用方法

溶液配制

1.         AF647 WAG儲備溶液(200X)配制

500 µL ddH2O 添加到粉末小瓶中,制成 2 mg/mL 的儲備溶液。【注】:重新配制的儲備溶液可在 4 下短期儲存,或在 -20 下長期儲存。

2.         AF647 WAG工作溶液(1X)配制

5 μL 200X WGA 儲備溶液添加到 1 mL HHBS 緩沖液中。【注】:不同細胞系的優(yōu)化染色濃度可能不同。活細胞的推薦起始濃度為 5-10 µg/mL

操作步驟

1.         活細胞染色

(1)       HHBS 緩沖液清洗細胞兩次。

(2)       添加 100 µL AF647 WAG 工作溶液。

(3)       將細胞與AF647 WAG 工作溶液在 37°C 下孵育 10-30 min

(4)       HHBS 緩沖液清洗細胞兩次。

(5)       使用 FITC 濾光片組在熒光顯微鏡上成像細胞。

2.         固定細胞染色

(1)       PBS中使用4%的甲醛固定細胞。【注】:對于固定細胞膜染色,建議在沒有透化步驟的情況下進行染色。固定后透化步驟會導(dǎo)致細胞內(nèi)區(qū)室染色,如高爾基體和內(nèi)質(zhì)網(wǎng) (ER) 結(jié)構(gòu)染色。

(2)       添加 100 µL AF647 WAG 工作溶液。

(3)       在室溫下用AF647 WAG 工作溶液孵育細胞 10-30 min

(4)       HHBS 緩沖液清洗細胞兩次。

(5)       使用 FITC 濾光片組在熒光顯微鏡上成像細胞。

圖示

                                               image.png

1. 使用AF647 WAG 5 µg/mL的濃度在活細胞(Hela細胞) 染色 30 min,然后用 Hoechst 33342Cat# AC12L021染色。最后使用帶Cy5DAPI 濾光片組的熒光顯微鏡成像。

 

注意事項

1.     本產(chǎn)品僅限于科學實驗研究使用,不得用于臨床診斷、治療等領(lǐng)域。

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