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真核細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑說明書,高效轉(zhuǎn)染試劑使用方法
真核細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑說明書,高效轉(zhuǎn)染試劑使用方法 2024-02-04

EZTrans細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑作為新一代的轉(zhuǎn)染試劑,其轉(zhuǎn)染原理是帶正電的陽離子聚合物與核酸中帶負(fù)電的磷酸基團(tuán)形成帶正電的復(fù)合物后與細(xì)胞表面帶負(fù)電的蛋白多糖相互作用,并通過胞吞作用進(jìn)入細(xì)胞。本產(chǎn)品經(jīng)過李記生物的優(yōu)化處理,具有轉(zhuǎn)染效率高,細(xì)胞毒性低,操作簡單,重復(fù)性好,適用范圍廣等特點(diǎn)。...

  • 高保真DNA聚合酶的操作方法介紹 2023-03-09

    高保真DNA聚合酶是一種具有高準(zhǔn)確性和高速度的酶,廣泛應(yīng)用于PCR擴(kuò)增、突變篩選、基因克隆、DNA測序等領(lǐng)域。其在基因工程和生物技術(shù)研究中有著十分重要的作用。作用原理:高保真DNA聚合酶可將DNA單鏈合成DNA雙鏈,并對DNA進(jìn)行擴(kuò)增。該酶的作用機(jī)理基于DNA聚合酶基本的催化反應(yīng)機(jī)制:利用DNA單鏈為模板,在DNA聚合酶的作用下,引物與模板互補(bǔ)結(jié)合進(jìn)行DNA聚合反應(yīng)。高保真DNA聚合酶的主要特點(diǎn)是:具有一定的3’-5’外切活性,能修正因PCR擴(kuò)增引入的多種誤差,如插入、缺失、...

  • DNA聚合酶和RNA聚合酶的異同點(diǎn) 2023-02-22

    DNA聚合酶是細(xì)胞復(fù)制DNA的重要作用酶,目前為止已發(fā)現(xiàn)有5種DNA聚合酶,分別為DNA聚合酶Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ,都與DNA鏈的延長有關(guān)。DNA聚合酶RNA聚合酶的相同點(diǎn):都能以DNA為模板,從5'向3'進(jìn)行核苷酸或脫氧核苷酸的聚合反應(yīng)。DNA聚合酶RNA聚合酶的不同點(diǎn):1、作用底物不同。RNA聚合酶底物是NTP;DNA聚合酶底物是dNTP。2、RNA聚合酶作用不需要引物,而DNA聚合酶作用需要引物。3、RNA聚合酶本身具有一定的解旋功能,而DNA聚合酶沒有,當(dāng)需要解開雙鏈的...

  • 細(xì)胞凍存和細(xì)胞凍存步驟 2023-01-16

    細(xì)胞凍存是細(xì)胞保存的主要方法之一。利用凍存技術(shù)將細(xì)胞置于-196℃液氮中低溫保存,可以使細(xì)胞暫時脫離生長狀態(tài)而將其細(xì)胞特性保存起來,這樣在需要的時候再復(fù)蘇細(xì)胞用于實(shí)驗(yàn)。而細(xì)胞凍存步驟及細(xì)胞凍存液的選擇也是影響細(xì)胞凍存效率及解凍復(fù)蘇后細(xì)胞活力的主要條件。下面就以細(xì)胞凍存液為例講解細(xì)胞凍存原理及細(xì)胞凍存的步驟。細(xì)胞凍存及復(fù)蘇的基本原則是慢凍快融,實(shí)驗(yàn)證明這樣可以最大限度的保存細(xì)胞活力。目前細(xì)胞凍存多采用甘油或二甲基亞砜作保護(hù)劑,這兩種物質(zhì)能提高細(xì)胞膜對水的通透性,加上緩慢冷凍可使...

  • 慢病毒的感染效率受哪些因素影響? 2023-01-06

    慢病毒是一種有包膜的RNA病毒,直徑為80-120nm,呈二十面體對稱結(jié)構(gòu)、球形。病毒顆粒最外層是包膜(包膜蛋白決定了感染細(xì)胞的類型),再往里依次為基質(zhì)蛋白和衣殼,最里面是兩條相同的正股RNA鏈和酶(逆轉(zhuǎn)錄酶、整合酶和蛋白酶)。慢病毒感染的顯著特點(diǎn)是感染個體在出現(xiàn)典型的臨床癥狀之前,大多經(jīng)歷長達(dá)數(shù)年的潛伏期,之后緩慢發(fā)病,因此這些病原體被稱為慢病毒。慢病毒包裝系統(tǒng)一般由慢病毒表達(dá)載體和慢病毒包裝載體組成。而慢病毒包裝質(zhì)粒可提供所有的轉(zhuǎn)錄并包裝RNA到重組的慢病毒載體所需要的所...

  • 細(xì)胞轉(zhuǎn)染是將外源性基因?qū)爰?xì)胞內(nèi)的一種技術(shù) 2022-12-31

    細(xì)胞轉(zhuǎn)染是將外源性基因?qū)爰?xì)胞內(nèi)的一種專門技術(shù)。隨著基因與蛋白功能研究的深入,轉(zhuǎn)染目前已成為實(shí)驗(yàn)室工作中經(jīng)常涉及的基本方法。常規(guī)轉(zhuǎn)染技術(shù)可分為兩大類,一類是瞬時轉(zhuǎn)染,一類是穩(wěn)定轉(zhuǎn)染。前者外源DNA/RNA不整合到宿主染色體中,因此一個宿主細(xì)胞中可存在多個拷貝數(shù),產(chǎn)生高水平的表達(dá),但通常只持續(xù)幾天,多用于啟動子和其它調(diào)控元件的分析。一般來說,超螺旋質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)染效率較高,在轉(zhuǎn)染后24-72小時內(nèi)(依賴于各種不同的構(gòu)建)分析結(jié)果,常常用到一些報告系統(tǒng)如熒光蛋白,β半乳糖苷酶等來幫...

  • 溶酶體是細(xì)胞內(nèi)的消化器官 2022-12-21

    溶酶體(Lysosomes)是動物細(xì)胞中重要的細(xì)胞器,其存在的完整性與動物生理病理均密切相關(guān)。溶酶體是真核細(xì)胞中為單層膜所包圍的細(xì)胞質(zhì)結(jié)構(gòu),內(nèi)部pH4~5,含豐富的水解酶,具有細(xì)胞內(nèi)的消化功能。新形成的初級溶酶體經(jīng)過與多種其他結(jié)構(gòu)反復(fù)融合,形成具有多種形態(tài)的有膜小泡,并對包裹在其中的分子進(jìn)行消化。因此,溶酶體具有溶解或消化的功能,為細(xì)胞內(nèi)的消化器官。溶酶體染色試劑盒可以標(biāo)記活細(xì)胞中的溶酶體,使之帶綠色熒光(Ex/Em=405/505nm)。本試劑盒使用染料為一種疏水性復(fù)合物,...

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